樣本間交叉污染

主要是在采（取）樣的過程中，由于取樣工具之間的交叉造成污染；或者在核酸提取的過程中，由于移液器、離心管等使用不當導致的污染。

PCR試劑的污染

主要是在PCR試劑配制過程中，由于移液器、容器、陰性對照及其它試劑被核酸模板或陽性對照污染。

質粒的污染

在實驗室操作中經常會用到陽性參考品，這些陽性參考品大多數是由某些質粒制作而成，質粒在單位容積內濃度高，不小心使用極易造成污染。

PCR擴增產物污染

這是PCR反應中常見的污染問題。因為PCR產物拷貝量大，遠遠高于PCR檢測數個拷貝的極限，所以極微量的PCR產物污染，就可造成假陽性結果。還有一種容易忽視，可能造成PCR產物污染的形式是氣溶膠污染，在空氣與液體面摩擦時就可形成氣溶膠，據計算一個氣溶膠顆粒可含4.8萬拷貝，因而由其造成的污染是一個值得特別重視的問題。

基因突變和拷貝數變異是遺傳病發生的主要遺傳學基礎，也是遺傳病檢測的主要靶標。遺傳病的復雜性伴隨著基因突變數目多、類型廣；基因拷貝數變異不僅表現為缺失和，而且缺失位置、大小以及倍數都呈現多樣性。遺傳變異的復雜性為遺傳病的臨床檢測提出了技術挑戰。實時PCR技術是我們近發展起來新一代實時PCR技術，利用熒光標記或熔點分析，可以在單個反應管內檢測多個靶標。

示例：人Y染色體AZF區微缺失檢測。

方法學：熒光PCR法。

用途：本產品用于定性檢測男性全血樣本中 Y 染色體無癥因子。（azoospermia

factor，AZF）區域是否存在缺失，具體檢測缺失位點為：AZFa：sY84、sY86；AZFb：sY127、sY134；AZFc：sY254、sY255；AZFd：sY145、sY152。

臨床研究表明，Y 染色體 AZF 區（AZFa, AZFb, AZFc,AZFd）不同程度的缺失可導致男性的、無精癥或畸形等癥狀，從而導致。本試劑盒可輔助診斷確診患者的病因分析，檢測結果僅供臨床參考，不能單獨用做確診或排除病例等臨床診斷的依據。

標本類型：全血。

檢測流程：

（1）樣本處理及 DNA 提取（在標本制備區完成）→（2）樣本處理及 DNA 提取（在標本制備區完成）→（3）加樣（在標本制備區完成）→（4）PCR

擴增（在擴增區完成）→（5）結果分析與判定。

其他同類項目：地貧、、尿癥（PKU）、蠶豆病（G6PD）、脊髓型肌萎縮（SMA）、進行性肌營養不良（DMD）、（HLA）、血友病。

適合開展的醫院和：婦幼、第三方、各種級別的有需求的醫院。

PCR實驗室設計的問題是如何避免污染。在實際工作中，常見的有以下幾種污染類型:擴增產物的污染;天然基因組DNA的污染;試劑的污染以及標本間的污染。因此要避免污染，首先應是預防，而不是排除。

工作區域的嚴格劃分，各個實驗區域要有明顯的標記(如醒目的門牌或不同的地面顏色等)，以避免各個不同實驗區域設備物品、試劑等發生混淆。

合理的系統設置，合理的空調通風系統設置，盡量采用全送全排的空調系統;嚴格的氣流壓力控制，保證不同的實驗區內不同的壓力要求。

規范的操作，臨床基因擴增檢驗實驗室的技術人員必須進行上崗培訓，在實驗操作過程中，操作者必須戴手套，并經常更換。清潔工作及時、正確。實驗工作結束后，必須立即對本區進行清潔。

嚴格的管理:嚴格控制進出實驗室的人員。在各個實驗區域使用帶有明顯區別標志的工作服(如不同顏色)，當工作人員離開時不得將本區的工作服帶至其它區域;盡量減少在實驗區內不必要的走動以減少交叉污染的可能性。擴增產物分析區是的擴增產物污染來源，廢液不能在實驗室中傾倒，必須經消毒液浸泡消毒后在遠離實驗室的地方棄掉，用過的吸頭等一次性材料也應經消毒液浸泡消毒后統一處理，如焚燒等。總之，實驗室建設是一個復雜的問題，這里不討論人員的問題，實驗室人員的培養與沉淀，也需要一個過程，在建設的過程中要因地制宜，不要生搬硬套，結合自己的實際慢慢摸索出適合自己發展的建設思路。科學合理建設實驗室，更好的發揮實驗室的作用。